《现代生物科技专题》
必记考试知识点30条
1、DNA重组技术：达成这一精准的操作过程至少需要三种工具，即准确切割DNA的分子手术刀限制性核酸内切酶（限制酶）、将DNA片断再连接起来的分子缝合针DNA连接酶、将体外重组好的DNA导入受体细胞的运输工具运载体。
2、限制酶：主要从原核生物中离别纯化出来，可以辨别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。形成黏性末端和平末端两种。
3、DNA连接酶：依据酶的来源不同分为两类：E.coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。二者都是将双连DNA片段缝合起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
4、常见的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌染色体以外并具备自我复制能力的双链环状DNA分子。
5、基因工程的基本操作步骤主要包含四步：目的基因的获得、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的测试与鉴别。
6、基因表达载体的构建是推行基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其目的是：是目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥用途。其组成是：目的基因、启动子、终止子、标记基因（鉴别受体细胞是不是含有目的基因，便于筛选）。
7、受体细胞有植物、动物、微生物之分。
8、目的基因导入受体细胞后，能否保持和表达其遗传特质，只有通过测试与鉴别才能了解。这是基因工程的第四步工作。
9、将目的基因导入植物细胞的办法：农杆菌转化法、花粉管通道法、基因枪法。
10、将目的基因导入动物细胞的办法：显微注射技术。
11、将目的基因导入微生物细胞：用CaCl2处置，增大细胞壁的通透性。
12、测试目的基因是不是插入到受体细胞的基因组中，是不是转录出mRNA的办法：DNA分子杂交技术（用目的基因做探针，假如显示出杂交带则成功）。
13、测试目的基因是不是翻译成蛋白质的办法：抗原抗体杂交。
14、除去分子测试外，有时还需要进行个体水平的鉴别，办法是：抗虫或抗病的接种实验。
15、目的基因的获得：从已有物种中直接离别，也可以人工合成。
16、目的基因：主如果指编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具备调控用途的因子。
17、PCR是聚合酶链式反应的缩写，是一种在生物体外复制特定DNA片断的核酸合成技术。其原理是：DNA双连复制的原理。首要条件是：要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便依据这一序列合成引物（两种）。过程是：高温变性、低温复性、中温延伸。
18、植物基因工奥创果累累：抗虫转基因植物，抗病转基因植物，抗逆转基因植物，借助转基因改良植物的品质。
19、动物基因工程前途远大：用于提升动物的成长速度，用于改变畜商品的品质，用转基因动物生产药物，用转基因动物做器官移植的供体，基因工程药品异军突起。
20、基因治疗：是把正常基因导入患者体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。这是治疗遗传病的效果最好的方法。其中成效比较靠谱的是体外基因治疗。
21、基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程是指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有些蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。
22、蛋白质工程的基本渠道：从预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构推断应有些氨基酸序列找出相对应的脱氧核苷酸序列（基因）。
23、具备某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具备发育成完整生物体的潜能，也就是说，每一个生物细胞都具备全能性的特征。
24、植物细胞工程：植物组织培养技术（基础）、植物体细胞杂交技术。
25、细胞脱分化：就是让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有些结构和功能而转变成未分化细胞的过程。创伤和外源激素可以使外植体细胞的合成代谢加大，不断分裂增殖形成愈伤组织。
26、植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给与适合的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最后形成完整植株。
27、植物体细胞杂交就是将不同种的植物体细胞，在肯定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培培养新的植物体的技术。
28、植物细胞工程的实质应用：植物繁殖的新渠道（微繁、作物脱毒、制造人工种子）、作物新产品种的培育（单倍体育种、体细胞诱变育种等）、细胞产物的工厂化生产（人参细胞发酵罐生产人参皂苷）。
29、动物细胞工程常见的技术方法有：动物细胞培养（基础）、动物细胞融合、动物细胞核移植、生产单克隆抗体等。
30、动物细胞培养就是从动物机体中取出有关的组织，将它分散成单个细胞（胰蛋白酶或胶原蛋白酶），然后，放在适合的培养基中，让这类细胞成长和增殖。
